进行性肌营养不良症
本文报道对 2 例强直性肌营养不良症患者和家系成员的ctg(胞嘧啶、胸腺嘧啶、鸟嘧啶)进行重复检测，以及与临床表现、心电图和肌电图的相关分析研究结果。
1 资料和方法 2 例强直性肌营养不良症(dm)患者和家系成员进行肌强直电位、mcv、scv、vep和心电图检查。按《实用神经病学》拟定的标准确诊。分别抽取10 ml静脉血置于肝素抗凝管摇匀。取 0.5 ml肝素抗凝，加入0.5 ml裂解缓冲液，混匀后用13 000×g离心20 s，吸去上清液，沉淀，重悬浮于1 ml裂解缓冲液。重复2～3次直至去净红细胞。然后离心去上清液后悬浮于0.1 ml聚合酶链反应(pcr)缓冲液中加3 ml/(10 mg*ml)的蛋白酶k，水浴后冻存备用。采用pcr热循环仪(美国perkin-elmer公司)，以改进的dna序列(正链5′-cgaagggtccttgtagccggga-3′和负链5′-catccacgtcagggcctcagc-3′)为引物，将反应体系25 ml扩增。25 ml pcr产物在电压100 v的电泳缓冲液中电泳5 h。在半干燥电转移装置(美国bio-rad公司)上，800 ma 1 h，将 dna 转移至带正电尼龙膜(德国boehringer mannheim公司)上。经地高辛标记后为探针，在烘好的尼龙膜上杂交过夜后显色。
2 结果 受检者中肌强直电位占4/8(50%)，均为家系2中有临床症状者。vep检查p100潜伏期延长者为 5/9(55.5%)，mcv减慢者3/8(37.5%)，scv减慢者2/8(25%)。ctg重复数大于35个者10/12，具有临床症状者ctg重复数均高(6/6)，无临床症状者ctg重复数异常4名(家系1)。心电图示传导阻滞多见，vep的p100潜伏期延长。mcv和scv减慢均见于ctg重复数高者。
3 讨论 dm 遗传位点在染色体19q13.3上，其基因动态突变发生在肌强直蛋白激酶基因3不翻译区，3个脱氧核苷酸ctg短串联重复，正常人ctg三核苷酸重复数目5～37个。当ctg拷贝数增加值超过正常数5%以上会致病，重复数在50～80个时被称为原始突变。我们所观察的两个家系大于35个者为10/12，具有临床症状者ctg重复数均高(6/6，100%)，无临床症状者ctg重复数异常占4/6。家系2中的ctg拷贝数均超过190个，先证者及其儿子则＞1 605个，临床症状亦重。家系1中未检出临床患病者，但3名有心电图异常，4名ctg拷贝数大于60个。结果说明ctg拷贝数与临床病情程度相一致。本文报道家系2为母系遗传，与国外同类报道一致。心电图、vep、scv、mcv和肌强直电位等证实，dm患者具有心脏、肌肉、中枢和周围神经等多系统的累及表现，有临床症状6名受检者均有白内障。心电图以传导阻滞多见，心电图示传导阻滞者其p100潜伏期亦延长，高于国内报道的50%。mcv和scv减慢均见于ctg重复数亦高者。ncv检查结果说明，dm患者神经末梢可能亦有病变，临床和肌电图分析仍然是临床诊断的主要手段。